这篇文章我很早就拜读了,很好,对于我们制定兔子的免疫程序有很大的帮助,强烈支持。$ ~' u* w6 `2 V5 W
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9 P$ d# H& X0 _8 h免疫日龄对兔病毒性出血症抗体水平和保护率的影响
2 B% Z; T# S3 t7 g薛家宾,杨龙圣,徐为中,胡元亮 0 Q2 C" ]3 Q% `6 v# P, |
(1江苏省农业科学院兽医研究所,江苏南京210014;2.南京农业大学动物医学院。江苏南京210095)
* B0 ]/ s- v- q7 E摘要:通过攻毒试验比较了新西兰家兔免疫前后0、1、2、3和4 log:5种抗体水平埘病毒性出血症(RHD)的保护效果,同时测定了30、35、4O、45、50、55和60日龄非免疫兔的母源抗体效价和用RHD组织灭活占免疫后8周内血清抗体效价的动态变化。结果表明,抗体效价高于3 log:时可产生100%的保护,2 l0g 的保护率仅为50%;母源抗体与日龄呈负相关,在30日龄时最高,可以产生有效的保护,在40日龄后已无保护作用;免疫日龄与抗体峰值和有效保护时间呈正相关,30日龄免疫,抗体效价不但不升,反而显著下降,无保护作用;35日龄免疫,抗体峰值较低,有效保护时间仅为2周;大于40日龄免疫,抗体峰值较高,有效保护时间延长。因此建议35日龄首免、2周后二免为最佳免疫程序。 3 {3 g5 Q4 U2 b6 _5 E0 C* o
关键词:兔病毒性出血症;免疫日龄;抗体效价;有效保护时间 7 l( M/ i4 [3 R0 ?% L
兔病毒性出血症(rabbit hemorrhagic disease,RHD)是由兔出血症病毒(RHD virus,RHDV)引起的家兔的一种急性、高度接触性传染病,常呈暴发性流行,发病率和死亡率极高,给养兔业造成极大的经济损失.。本病主要感染2月龄以上青壮年兔,2月龄以内兔具有一定抵抗力J,未断乳兔很少发病l】J,或感染后只有轻微症状。但是近年来,本病的流行和发病特点趋向于幼龄化J,幼兔暴发疫情时有发生J,因此,寻找合理的免疫程序或理想的疫苗具有重要意义。本研究首先通过攻毒试验比较了新西兰家兔免疫前后0、l、2、3和4 log 5种抗体水平对RHD的保护效果,同时测定了30、35、40、45、50、55和60日龄非免疫兔的母源抗体效价和用RHD组织灭活苗免疫后8周内血清抗体效价的动态变化,旨在探讨抗体水平对保护效果的影响、母源抗体的消长规律、免疫日龄与抗体峰值和有效保护时间的关系,为选择免疫注射的最低日龄、制定合理的免疫程序提供理论依据。 * u( J, Q7 A3 u3 Y2 @/ a( Z4 O
1 材料与方法 , z( x }) w) d3 \
1.1 材料
: o; {. @& Q5 B非免疫新西兰肉兔,由江苏省农业科学院兽医研究所实验动物中心提供。兔病毒性出血症组织灭活疫苗、兔病毒性出血症抗原(RHDV)、兔病毒性出血症阳性血清、兔病毒性出血症阴性血清,均由江苏省农业科学院兽医研究所提供。人“0”型血,由南京军区总医院提供。 ! j2 P3 z v0 s$ G5 j
TGL一16G型台式高速离心机,上海医用分析 # n7 G5 a. ]5 J' S' l' m
仪器厂生产;WMK一2型恒温箱,南京试验仪器厂
. ` w& t0 b2 d( `, B T& [; b( {生产;100 HI移液枪,Eppendorf公司生产;大孔U型
, u0 |" n; ?8 U' X% q# `0 O* J血凝板。 " v, ^& D3 ~+ P V) n
1.2 攻毒试验 . P" K! i6 a% \! @5 j1 S9 |# [
选取免疫前后HI抗体效价分别为0、l、2、3、4的家兔各6只,分别注射HA为3的RHDV液l ml攻毒,记录死亡时间、剖检病变,并进行兔出血症鉴定,比较不同Ⅲ 效价水平的保护率。 - z' C) S) J" J3 i+ A9 u
1.3 母源抗体水平的测定 : ~% A4 l5 T) r5 s- T
取30、35、40、45、50、55和60日龄的新西兰兔各4只,耳缘静脉采血,分离血清,56。二水浴锅内灭活30 min,测定母源抗体效价。 / ~- l, @7 n9 y& v' c& c/ m5 m
1.4 免疫试验 3 E% }/ v7 B2 p4 k: c# h
取1.3所述家兔,分别颈部皮下注射兔病毒性出血症灭活疫苗1 m1免疫。分别于免疫1~8周同法采血、测定免疫后抗体效价的动态变化。
1 |; n7 O/ l/ J9 @# i1.5 抗体效价测定方法
/ e' J% _; q( n2 g/ Q- s3 G) M( c用微量血凝抑制(HI)法J。取待检血清50,在血凝板上用等量生理盐水倍比稀释6个梯度,每孔加入4单位血凝病毒,37℃感作30 min,加入等量的1%新鲜人“0”型红细胞,4℃感作30 min,观察结果。同时设阳性血清和阴性血清对照。测定重复3次,结果以平均数±标准差表示,用SPSS软件统计分析。
4 H( L' l& Q0 E" e: O! Y0 ^2 结果与分析
1 M6 p: o% I* ^/ @2.1 不同抗体效价水平的保护效果
% {* |: k5 r* a抗体效价高于3 log 时可产生100%的保护,效价为2 log 的保护率仅为50% ,效价在2 log 以下时,无保护效果(表1)。 |