这篇文章我很早就拜读了,很好,对于我们制定兔子的免疫程序有很大的帮助,强烈支持。' X- |2 |% Q7 A6 p
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6 o J& d. g& T! w" Z" o免疫日龄对兔病毒性出血症抗体水平和保护率的影响
! g# g% J- _* W& I/ G2 {+ S# q薛家宾,杨龙圣,徐为中,胡元亮 ; a! h5 V. ~" ^% E* H- H9 Z9 G0 K9 H
(1江苏省农业科学院兽医研究所,江苏南京210014;2.南京农业大学动物医学院。江苏南京210095) 9 m+ _7 x; l2 t6 x6 v
摘要:通过攻毒试验比较了新西兰家兔免疫前后0、1、2、3和4 log:5种抗体水平埘病毒性出血症(RHD)的保护效果,同时测定了30、35、4O、45、50、55和60日龄非免疫兔的母源抗体效价和用RHD组织灭活占免疫后8周内血清抗体效价的动态变化。结果表明,抗体效价高于3 log:时可产生100%的保护,2 l0g 的保护率仅为50%;母源抗体与日龄呈负相关,在30日龄时最高,可以产生有效的保护,在40日龄后已无保护作用;免疫日龄与抗体峰值和有效保护时间呈正相关,30日龄免疫,抗体效价不但不升,反而显著下降,无保护作用;35日龄免疫,抗体峰值较低,有效保护时间仅为2周;大于40日龄免疫,抗体峰值较高,有效保护时间延长。因此建议35日龄首免、2周后二免为最佳免疫程序。
" b( D1 s" T; F8 s: v关键词:兔病毒性出血症;免疫日龄;抗体效价;有效保护时间 ; e. b' N+ _" c* @% H
兔病毒性出血症(rabbit hemorrhagic disease,RHD)是由兔出血症病毒(RHD virus,RHDV)引起的家兔的一种急性、高度接触性传染病,常呈暴发性流行,发病率和死亡率极高,给养兔业造成极大的经济损失.。本病主要感染2月龄以上青壮年兔,2月龄以内兔具有一定抵抗力J,未断乳兔很少发病l】J,或感染后只有轻微症状。但是近年来,本病的流行和发病特点趋向于幼龄化J,幼兔暴发疫情时有发生J,因此,寻找合理的免疫程序或理想的疫苗具有重要意义。本研究首先通过攻毒试验比较了新西兰家兔免疫前后0、l、2、3和4 log 5种抗体水平对RHD的保护效果,同时测定了30、35、40、45、50、55和60日龄非免疫兔的母源抗体效价和用RHD组织灭活苗免疫后8周内血清抗体效价的动态变化,旨在探讨抗体水平对保护效果的影响、母源抗体的消长规律、免疫日龄与抗体峰值和有效保护时间的关系,为选择免疫注射的最低日龄、制定合理的免疫程序提供理论依据。 9 I) y8 K/ J1 h. z- X& d
1 材料与方法 ! f! h* _" w+ c8 U
1.1 材料 ' ]. A; h {& Z# z) r4 G P
非免疫新西兰肉兔,由江苏省农业科学院兽医研究所实验动物中心提供。兔病毒性出血症组织灭活疫苗、兔病毒性出血症抗原(RHDV)、兔病毒性出血症阳性血清、兔病毒性出血症阴性血清,均由江苏省农业科学院兽医研究所提供。人“0”型血,由南京军区总医院提供。
$ f# k! v6 j( O8 ITGL一16G型台式高速离心机,上海医用分析 ( P( E! ?7 B& l- \: o; N5 x4 d4 y
仪器厂生产;WMK一2型恒温箱,南京试验仪器厂 + j/ N; |' `& _! r9 ?/ J
生产;100 HI移液枪,Eppendorf公司生产;大孔U型
5 [8 J* r+ |7 f% y+ y! a5 J血凝板。
, ~. M2 A" d0 E* d) u1.2 攻毒试验
% \! M- N3 X; ]# i2 P& d选取免疫前后HI抗体效价分别为0、l、2、3、4的家兔各6只,分别注射HA为3的RHDV液l ml攻毒,记录死亡时间、剖检病变,并进行兔出血症鉴定,比较不同Ⅲ 效价水平的保护率。
! _: m6 k1 U! e0 I' \1.3 母源抗体水平的测定 * M2 V3 E! a N
取30、35、40、45、50、55和60日龄的新西兰兔各4只,耳缘静脉采血,分离血清,56。二水浴锅内灭活30 min,测定母源抗体效价。
3 @2 a: Y$ M: i( J/ Q1.4 免疫试验 4 O# {! m2 V% h$ ?
取1.3所述家兔,分别颈部皮下注射兔病毒性出血症灭活疫苗1 m1免疫。分别于免疫1~8周同法采血、测定免疫后抗体效价的动态变化。 , K/ C( T8 M3 L3 r
1.5 抗体效价测定方法 # y+ f4 @1 K/ g( Z" e
用微量血凝抑制(HI)法J。取待检血清50,在血凝板上用等量生理盐水倍比稀释6个梯度,每孔加入4单位血凝病毒,37℃感作30 min,加入等量的1%新鲜人“0”型红细胞,4℃感作30 min,观察结果。同时设阳性血清和阴性血清对照。测定重复3次,结果以平均数±标准差表示,用SPSS软件统计分析。 " h# }8 N3 v9 |4 j: y
2 结果与分析
) Q2 p4 `3 ~5 E5 C2.1 不同抗体效价水平的保护效果 9 `. h" H+ s3 P7 h
抗体效价高于3 log 时可产生100%的保护,效价为2 log 的保护率仅为50% ,效价在2 log 以下时,无保护效果(表1)。 |