人工授精技术

刁雪

家兔实行人工授精是一项先进科学的配种方法，它与传统的自然交配方式比较有以下特点：1、可以节省种公兔的饲养成本；2、可以防止品种退化，保持和不断提高兔群的品种质量；3、可以充分利用优良种公兔的精液资源，而且繁殖的仔兔个体大，生长快，成活率高，出栏早，收入多；4、避免了种兔间的直接接触机会，可预防兔病的传播。
    人工授精主要有采精、精液品质检查、精液的浓缩或稀释、精液的保存和输精等几个关键的工序。
   1、采精中的技术要领
    (1)种公兔的准备  种公兔在采精前1个星期和整个采精期间必须加强营养、增强光照和运动，并每天放到外边活动2个小时。经过1个星期的营养补充和诱导发情后，其性活动已明显增强，此时也是精液生成最旺盛的时机。在采精的前2天，让公兔与母兔自然交配2次，这时，再采精便会获得最佳品质的精液。采精的时间最好选择家兔性欲最活跃的清晨或晚上凉爽时进行。
    第一次采精后，可每隔l天采2次（清晨、晚上各1次）连续2个星期、休息1个星期，然后再重复上述过程。如果公兔已停止使用15天以上，在使用前都要有一个上述的调理过程。
    (2)采精器的准备
    第一，假阴道，外壳为直径30毫米，长80-85毫米的硬塑料管，内胎为人用**。
    第二，采精杯，为双层玻璃套瓶。外层为棕色保护瓶，内层为贮精瓶，两层中间是45℃保温水。
    第三，采精器的清洗与消毒。上述物品在使用前先用洗衣粉和1%高锰酸钾刷洗干净，再用自来水、蒸馏水（或注射用水）依次冲洗，然后将塑料管和集精杯在干燥箱内160℃或在沸水内消毒20-30分钟。**用蒸汽消毒15分钟。消毒是关系精液品质保存的关键环节，一定要一丝不笱地进行。
    第四，假阴道的安装。首先将消毒好的**从管内穿过，从管的另一端穿出，这时将40毫升左右的45℃热水倒到**和塑料管的中间。然后，把**穿出来的这一端翻过来，同样套在塑料管上，并用皮筋或胶圈固定，防止漏水或滑脱。
    集精杯两层中间加37 ℃灭菌的温水，然后安装在假阴道的一端，固定。使用前采精器整个内腔用配制的等渗精液稀释液冲洗1-2次。
    第五，采精的方法。将大小适宜、体质健壮、发情良好的母兔做台兔，将其阴部清洗消毒后，抓到公兔笼内，先让公兔与台兔调情片刻，以引起公兔的性欲。当公兔出现性冲动开始爬跨时，采精者左手抓住台兔的双耳及领皮，头向采精者方向固定，右手握住安
装好的假阴道，以中指和无名指护住集精杯，从台兔腹部一侧伸向台兔两后腿之间，使假阴道口紧贴在阴门下部，并稍微用力托起台兔臂部，当公兔爬跨阴茎挺出时，立即调整方向和位置，用假阴道迎接交合，只要方向和位置适宜。公兔一般都能把阴茎插入假阴道内。此时，公兔臀部快速抽动，然后突然向前一挺，伴随一声尖叫，倒在台兔一侧，说明公兔已射精完毕。这时，及时把假阴道迅速抽出。竖直，取下集精杯，采精完毕。
    2、精液品质检验要领
    采集的精液一般都要进行品质检验。精液的品质检查主要包括以下内容。
    (1)射精量  一般公兔射精量为0.5-2毫升，根据其射精间隔时间的长短有一定的影响．精量愈多，精子密度愈高，活力愈强，表示精液的品质愈好．
    (2)颜色和气味  正常家兔的精液颜色为粘稠的淡乳白色，略带点腥味或无味。
    (3)精子的活力  精子的活力是根据呈直线前进运动的精子总量的百分比而判定。一般分为十个等级。如果全部精子几乎都是呈直线前进运动的则评为“1.0”级，如果90%呈直线运动则评为“0.9”级，依次类推，直到0.1级。如果没有直线运动的精于，则为“0”级。
    观察方法是：将0.5毫升精子在35℃温水中预热和液化5分钟，然后，用乳头吸取管吸取少许精液，滴于载物玻片上，轻轻盖好盖玻片，放在显微镜下，用显微镜观察，看精子的活力和密度大小。优质精液，呈直线运动的精子在70%以上。合格精液呈直线运动的精子在60%以上。
    (4)精子的密度  测定精子的密度有两种方法，一种是估测法，一种是计数法。
    ①估测法：估测法是直接观察显微镜视野中精子的稠密程度。精子布满整个视野，像云雾一样为高度密集。这种精液浓度为每毫升精子3亿以上。精子在视野间有明显的空隙，相当于是2个精子的长度，可以看清各个精子的活动情况，这种精液为中等密集，每毫升有精子l亿-2亿。精子在视野中零星分布，空隙很大，超过2个精子长度，这种精液为稀薄，每毫升精子在l亿以下。
    估测法一般在平时采精时使用。如果精子要进行精选保存，最好用计数法对精子密度进行评定。
    ②计数法：计数法是检查精子数量最准确的方法。取精液稀释液1毫升于试管内，用毛细吸管吸取0.01毫升精液于稀液内混匀，然后用滴棒将稀释好的精液滴入血细胞计数板的计数池内，计数5个方格内的精子数，乘以10万即可得每毫升精子总数。精子总数在2亿以上为优，1亿以上为合格。
    在进行人工授精时，所采用的精液其射精量应2毫升左右，精子活力在0.7以上，精子密度为每毫升1.5亿以上的优良品质精液。
    (5)精子的形态  精子的形态是关系到精子质量的另一项重要指标。正常的精子呈比例匀称的蝌蚪形。畸形精子有头部过大、头部过小、头部残缺、尾部残缺、头部断折、双头双尾、尾部卷曲断折等多种，未成熟的精子也属畸形精子，正常情况下，精子畸形率一般不超过15%。
    精子形态检查方法如下：用清洁吸管吸取原精液一小滴于干净玻片一端，另取一载物玻片如制作血片一样制成均匀的精液抹片。待抹片自然干燥后，用龙胆紫染色3分钟，冲去染料后，用滤纸吸干水分放在400或600倍显微镜下观察，计数500个精子，数出畸形精
子。计算公式为：
    畸形率=畸形数／500×100%
    3、精液的稀释
    采出的精液在人工输精时都要先进行稀释。稀释目的是为了扩大精液的容积，增强精子的活力，延长精子的寿命，便于精子的运输和保存。常用的精液稀释液主要有以下三种。
    (1)5%的葡萄糖卵黄稀释液  将医院输液用的10%葡萄糖溶液用注射用水稀释成7.6%的浓度，用注射器抽取1-3毫升新鲜的卵黄加入到7.6%的葡萄糖溶液中，然后加入青、链霉素各10万单位摇匀即成。
    (2)1 1%蔗糖卵黄稀释液  取蔗糖1 l克加蒸馏水80毫升，待溶解后加水到100毫升，过滤，密封，高压灭菌20分钟，待温度降至25℃时，用注射器抽取1-3毫升新鲜卵黄加入11%蔗糖溶液内，再加青、链霉素各10万单位摇匀即成。
    (3)蔗糖、奶粉、磷酸盐稀释液  取磷酸二氢钠0.41克，磷酶氢二钠1.69克，溶于50毫升蒸馏水中。取蔗糖5.5克，牛奶2.5克放入磷酸盐溶液中，再加蒸馏水到100毫升。过滤后密封高压消毒20分钟，冷后加入青、链霉素各10万单位摇匀即成。
    上述稀释液可在4℃保存14天左右。最好现用现配，以免时间过久变质腐败。
    上述稀释液使用前都要在温水中预热到35℃时再用。
    精液稀释时，取品质优良的精液l毫升和精液稀释液3-5毫升混合即成（要保证每毫升直线运动精子数量在1500万个以上）
  4、输精技术要点
  家兔人工授精应着重掌握什么时候输和怎样输两个要点。
  家兔属于交配刺激排卵的动物。也就是说母兔在发情期间，只有经过公兔爬跨交配刺激后，母兔卵巢中的卵才会在10-12小时排出来。若不进行交配刺激，卵巢中的卵便会在体内自行萎缩，退化吸收。因此，在给发情母兔输精前，必须先用结扎的公兔进行爬跨交配刺激，或者注射性激素促其卵巢排卵。
    具体操作方法是，当发情母兔阴部由粉红变成老红色，正值旺情期时，将其放入已结扎的公兔笼内，让公兔与其自然交配后取出。过5-6个小时以后输精，此时输精成功率一般都在80%以上。
    也可以用药物刺激排卵3号，6个小时后输精。
    为了保证输精成功，可在第二天再重复输精1欢，这样成功率可提高到90%以上。
    (1)输精器的准备  用规格为5毫升注射器和l根150毫米长的女用导尿管经消毒处理后，放在无菌盒中待用。
    输精前用注射器吸取2-3毫升精液稀释液套上输精管（导尿管）冲洗1-2次，然后将待输的精液吸入注射器内，套上输精管。输精准备完毕（这里有一个重要的操作环节请注意。为了防止精液在输精管中滞留。可在注射器抽取精液之前先吸入l毫升的空气。输精时连
同空气一同推入阴道内，这样输精管内的精液可全部推入阴道）。
    (2)输精操作  先将母兔保定好，外阴用生理盐水或5%的葡萄糖冲洗液撩洗干净。然后把母兔臀部抬高，输精者左手分开阴唇，右手持输精管缓缓插入阴道。当插入7～8厘米深时（家兔阴道长度一般在8—12厘米）将胶管来回抽动数次，刺激母兔，然后将精液注入。输完后，将母兔臀部拍几下，让母兔阴道收缩，这样可防止精液倒流，输精后要让母兔安静休息。
    (3)注意事项
    第一，在整个输精过程中一定要严格消毒，无菌操作。防止出现感染。
    第二，在整个输精过程中，要保证输精器具内没有对精子有害的药物及液体，保证精液温度和输入过程尽量模仿生物自然交配过程，手法要轻，操作要干净利落。
    第三，输精的部位一定要准确无误。母兔的膀胱在阴道内5-6厘米深处的下方，插入输精管时，极易插入尿道口中，因此在插管时要沿阴道壁的背侧面插入约6-7厘米深处。越过尿道口以后再往里插1-2厘米，如没有尿液流出证明已插入子宫，这时再输入精液。
    第四，输精完毕后，器具要及时清洗，消毒，防止液体在里边粘结，影响下次使用。
    第五，输精完后及时进行登记，备案。
    5、精液的保存
    精液经过稀释处理后，可以存放在一定的恒定温度中保存。如果现采现用，精液保存在30℃左右的环境中即可。若存放4-8小时时，可保存在15-20℃室温环境中。若需长时间保存则须先缓慢降温，再放入冰箱（或冷藏杯等其他代用物）保存在0-5℃的环境中，使用时再缓慢升温。据实验，只要保存得当，精子的生存时间可达200小时以上。
    人工授精是一项必须经过长时间实践摸索才能熟练掌握的一项实用技术。绝对不是告诉你怎样操作，你就能立刻掌握的。你必须要有一个反复熟练的过程。一个篮球运动员不投上万次球不可能成为神投手，一个显微外科医生不经过一年的血管缝合练习上不了手术台。
    给兔子人工授精也是如此。只有长时间不断练习才能掌握。很多人给兔子人工授精，输了几次没成功就厌倦丧气了，这是许多人失败的主要原因。
    本帖选自渔汛老师的《三针两料生态养兔法》一书（此书为渔汛老师《新法养兔》的改进版，淘宝有售），希望能对你有所帮助，对本文观点不认同的请绕路，请不要拍砖，谢谢，如想交流可加QQ11299622，欢迎光临我的淘宝店铺，淘宝搜索店铺：养兔乐园，即日起将陆续转载渔汛老师的一些文章和书籍内容，敬请关注

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